操作人員使用Elisa試劑盒前的操作須知介紹
點擊次數(shù):443 更新時間:2022-06-27
Elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),往預(yù)先包被GSH捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌,用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成較終的黃色,顏色的深淺和樣品中的GSH呈正相關(guān),用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
Elisa試劑盒的操作須知:
1.分析前質(zhì)控
?、?特色 :在固相外表組裝免疫活性物質(zhì)形成“免疫吸附劑”;
?、?酶標記免疫活性物質(zhì),進行信號擴大;
③ 有二步溫育反應(yīng)二次洗滌過程;
④ 靈敏度特異性相對較高;
?、?局限性:只能檢測到ng;
?、?精密度差(批內(nèi)CV15-20%);
?、?線性規(guī)模窄(一個數(shù)量級);
⑧ 存在"HD-HOOK"效應(yīng)。
2.試驗檢測人員需經(jīng)過培訓(xùn),把握這幾方面的技術(shù)知識:
?、?檢驗項目的基本原理;
② 臨床意義;
?、?熟悉檢測技巧,了解易出差錯的環(huán)節(jié)及難點;
④ 熟悉檢測試劑功能(包括試劑盒組成,包被片段及其組成);
?、?熟悉檢測儀器的原理及功能;
?、?把握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量操控知識;
?、?某些特別項目的檢測如抗HIV等需經(jīng)有關(guān)部門組織的專門培訓(xùn)班,考試合格后持證上崗。