哪些原因會導(dǎo)致Elisa試劑盒溢值?
點擊次數(shù):520 更新時間:2020-12-22
Elisa試劑盒適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型,Elisa試劑盒試驗過程繁瑣,為什么ELISA會出現(xiàn)“溢值”的現(xiàn)象呢,下面我們來仔細(xì)說說。
?、?樣品/標(biāo)準(zhǔn)品不正確稀釋。
② 孵育時刻/溫度不正確。
?、?ELISA試劑盒在孵育時為蓋上酶聯(lián)板覆蓋物:在孵育時需蓋上酶聯(lián)板覆蓋物,以避免液體蒸騰或孵育期間的污染。每個試劑盒內(nèi)均有滿足數(shù)量的酶聯(lián)板覆蓋物。
?、?檢測波長不正確:要確保分光光度劑的檢測波長是正確的。
?、?TMB底物的顯色時刻過長:請監(jiān)控顯色時刻。闡明書中所示的顯色時刻或許因為溫度和其它檢測條件的不同而稍有變化。
?、?樣品不適合此檢測:在闡明書中會列出每種產(chǎn)品的適用標(biāo)本范圍,超出范圍的標(biāo)本或許不適于此試劑盒或者檢測條件需要探索。
?、?樣品/標(biāo)準(zhǔn)品污染:樣品或標(biāo)準(zhǔn)品的污染或許會導(dǎo)致檢測成果“溢值”。
?、?巧合試劑不正確稀釋:要嚴(yán)厲依照說明書來稀釋巧合試劑,濃度過高會形成OD的“溢值”HRP巧合試劑的不正確稀釋
?、?所用稀釋液不對: ELISA試劑盒只能運用相應(yīng)試劑盒內(nèi)的稀釋液稀釋樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。
ELISA試劑盒的*優(yōu)勢如下:
、參與反應(yīng)的化酪胺總量與微孔中HRP的量成比例。
2、經(jīng)孵育后,未結(jié)合的化酪胺通過洗滌去除。
3、洗滌去除未反應(yīng)的化酪胺后,加入信號擴增試劑II與復(fù)合物的多個位點結(jié)合,此放大步驟可有效增加zui終參與催化TMB底物的HRP分子數(shù)量。