紅細(xì)胞膜蛋白7.2b(STOM)ELISA試劑盒洗滌方法:
. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時(shí),均需充分混勻,并盡量避免起泡。
.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品00μl,注意不要有氣泡,加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 00μl(在使用前5分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育小時(shí)。
3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前5分鐘內(nèi)配制)00μl,加上覆膜,37℃溫育小時(shí)。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液00μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育5分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí),即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測(cè)量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測(cè)程序。
9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
小鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞衍化營養(yǎng)因子(mouse GDNF)
小鼠生長因子(mouse GH)
小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子3(mouse GATA3)
小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子4(mouse GATA4)
小鼠低氧誘導(dǎo)因子α(mouse HIF-α)
小鼠熱休克蛋白60(mouse Hsp-60)
小鼠組胺(mouse HIS)
小鼠肝生素(mouse HGF)
小鼠糖化血紅蛋白(mouse HbAc)
小鼠組胺(mouse Histamine)
小鼠熱休克蛋白70(mouse HSP70)
小鼠羥(mouse HYP)
小鼠高遷移率族蛋白(mouse HMGB)
小鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子- (mouse sICAM-)
小鼠干擾素-a(mouse IFN-a)
小鼠干擾素-b(mouse IFN-b)
小鼠干擾素-r(mouse IFN-r)
小鼠類胰島素生長因子-(mouse IGF-)
小鼠類胰島素生長因子-2(mouse IGF-2)
小鼠類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-(mouse IGFBP-)
小鼠類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-2(mouse IGBPF-2)
小鼠類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-3(mouse IGBPF-3)
小鼠IgA(mouse IgA)
小鼠IgE(mouse IgE)
小鼠IgG(mouse IgG)
小鼠IgM(mouse IgM)
小鼠白介素-a(mouse IL-a)
小鼠白介素-b(mouse IL-b)
小鼠白介素-RA(mouse IL-ra)