細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

人肝癌細胞;SK-HEP-1-luc-EGFP

商品屬性

商品介紹

細胞別稱；SK-HEP-1-LUC-EGFP；人肝癌細胞-熒光素酶標記-綠色熒光蛋白；人肝癌細胞-LUC-EGFP

種屬來源；人

年齡性別；男，52歲

組織來源；肝臟

生長特性；貼壁生長

細胞形態(tài)；上皮細胞樣

puro藥篩濃度；SK-HEP-1-LUC-EGFP細胞puro藥篩濃度為1.0ug/ml，培養(yǎng)過程中建議使用0.5ug/ml濃度puro維持

細胞代數(shù)；10代以內(nèi)

參考資料(來源文獻)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。

（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細胞凍存

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)檢測試劑盒 ，英文名： 6-keto-PGF1a ELISA Kit

Mouse maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/G 小鼠基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/G

Mouseglucocoicoidreceptor-β,GR-βELISAKit 小鼠糖皮質激素受體β(GR-β)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanSecretinELISAKit人促胰液素/胰泌素

通用型直鏈淀粉比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKit大鼠受體

Spike中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 標簽) Protein

TFF3 (trefoil factor3 0.5mgTFF3 (trefoil factor3) 三葉肽因子3(多肽)

IL18R1重組人 IL18R1 / CD218a 蛋白 Protein

EDNRB Protein Human 重組人 EDNRB / Endothelin B receptor 蛋白

CLMP Protein Human 重組人 ASAM / CLMP 蛋白

TFF3 (trefoil factor3 0.5mgTFF3 (trefoil factor3) 三葉肽因子3(多肽)

EDNRB Protein Human 重組人 EDNRB / Endothelin B receptor 蛋白

Spike中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 標簽) Protein

CLMP Protein Human 重組人 ASAM / CLMP 蛋白

IL18R1重組人 IL18R1 / CD218a 蛋白 Protein

人肝癌細胞;SK-HEP-1-luc-EGFP小鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat ai cardiolipin aibody IgA (ACA-IgA) ELISA Kit 大鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)檢測試劑盒

Humahioredoxieductase,xRELISAKit 人硫氧還蛋白還原酶(xR)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanaibodytogroupAseptococcalpolysaccharide,ASP檢測試劑盒人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物過氧化氫酶(CATALASE)過氧化活性比色法定量檢測試劑盒20次

Humanα-sarcomericactin,α-SCAELISAKit人α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠檢測試劑盒   小鼠試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠試劑盒、小鼠檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠乙酰檢測試劑盒   小鼠乙酰試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠乙酰試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠乙酰試劑盒、小鼠乙酰檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠單胺氧化酶檢測試劑盒   小鼠單胺氧化酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠單胺氧化酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠單胺氧化酶試劑盒、小鼠單胺氧化酶檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

兔子前列腺素E2檢測試劑盒   兔子前列腺素E2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子前列腺素E2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子前列腺素E2試劑盒、兔子前列腺素E2 檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。