產(chǎn)品展示
人高分化脂肪肉瘤細(xì)胞;94T778
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁生長 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 人細(xì)胞系 |
商品介紹
細(xì)胞別稱;94T778;人高分化脂肪肉瘤
種屬來源;人
年齡性別;女,68歲
組織來源;脂肪
細(xì)胞形態(tài);成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù);10代以內(nèi)
細(xì)胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
保藏機構(gòu);atcc
培養(yǎng)基;DMEM+10% FBS+PS
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無血清凍存液,液氮儲存
細(xì)胞處理:
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時,進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,加入2倍量的中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
(9)細(xì)胞凍存
公司正在出售的產(chǎn)品:
半乳糖凝集素9(GAL9)重組蛋白 Recombinant Galectin 9 (GAL9)
CDON Protein Human 重組人 CDON / CDO 蛋白
EGFR重組小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
IL2RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL2RA 蛋白
LYZL2重組人 Lysozyme 2 / LYZL2 蛋白 Protein
LYPD3重組小鼠 C4.4A / LYPD3 蛋白 Protein
Alpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原 0.5mgAlpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原)
NLK重組人 nemo-like kinase / NLK 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CDON Protein Human 重組人 CDON / CDO 蛋白
ENPEP Protein Rat 重組大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白 (aa 41-945, His 標(biāo)簽)
小鼠C(VC)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human phosphatidylinositol specific phospholipase C (PIPLC) ELISA Kit 人0酯酰肌醇特異性0酯酶C(PIPLC)檢測試劑盒
Human2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPGELISAKit 人2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenLeukemiainhibitoryfactor,LIF檢測試劑盒雞白血病抑制因子(LIF)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞JNK/SAPK蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MouseGATAbindingprotein4,GATA4ELISAKit小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
人高分化脂肪肉瘤細(xì)胞;94T778小鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISAKit ELISA. 96T/48T
中文名稱 方法 規(guī)格
小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
大鼠促腎上腺皮質(zhì)素釋放激素結(jié)合蛋白(CRHBP)檢測試劑盒 ,英文名: CRHBP ELISA Kit
P selectin (P-S 人P選擇素(P-S
Ratsolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 大鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforCT-1ELISAKit大鼠心肌營養(yǎng)素1
細(xì)胞涂片巴氏(papanicolaou;PAP)染色試劑盒50次
RatEndomeiumAibody,EMAbELISAKit大鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。