產(chǎn)品展示
Sf21 (昆蟲卵巢細胞)
商品屬性
種屬 | 昆蟲 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
生長特性 | 半貼半懸 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
細胞形態(tài) | 圓形 | 編號 | GOY-01X0203 |
商品介紹
別稱 SF21; Sf-21; SF-21; IPLB-SF-21-AE; IPLB-Sf21-AE; IPLB-SF21-AE; IPLB-SF 21AE; IPLB-Sf21AE; IPLB-SF21AE; IPLB-SF-21; IPLB-Sf-21; IPLB-SF 21; IPLB-Sf21; IPLB-SF21
年齡(性別) 蛹
組織來源 卵巢
生長特性 半貼半懸
細胞形態(tài) 圓形
參考資料(來源文獻)
Sf21細胞是源于雌性草地貪夜蛾蛹的卵巢組織,是Sf9細胞的克隆系;Sf21細胞可以用于昆蟲病毒的基礎研究和復制桿狀病毒表達載體。 |
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 TNM-FH+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~26-72 hours
凍存條件
凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,;
溫度:28℃
細胞處理:
1) 凍存細胞的復蘇:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。
細胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時,進行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落,加入2倍量的中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細胞,吹打細胞使其均勻分散。
(7)吸棄細胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
(9)細胞凍存
公司正在出售的產(chǎn)品:
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細胞接收后的處理:
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
F81 (貓腎細胞) | RK-13 (兔腎細胞系) | 104C1 (轉(zhuǎn)化的豚鼠胎體細胞) | C6/36 Clone C6/36 (蚊子細胞) |
Tb 1 Lu (蝙蝠肺細胞) | DT40 (雞淋巴瘤細胞) | Mv.1.Lu NBL-7; Mv1Lu (貂肺上皮細胞) | CCC-SMC-1 (兔主動脈平滑肌細胞) |
Pt K1 NBL-3 (袋鼠腎細胞) | EBTr NBL-4 (牛胚氣管細胞) | ||